他的藏品来源，大致有四。一，吴大澂遗留。吴大澂精鉴赏、富收藏，对金石书画颇有研究，为官之余撰写了数部有关古文字及书法方面的重要著作，他所藏字画多归吴湖帆。二，沈韵初所赠。沈韵初为吴湖帆外祖父，亦有不少收藏，其中以董其昌书画为多，曾以“宝董阁”名其斋室并请人治印。董其昌对吴湖帆颇有影响，沈韵初将所藏董氏书画悉贻吴湖帆，故在梅景书屋的藏品中，董其昌的作品一直占有显著的份量。三，潘静淑嫁资。潘静淑乃苏州名门，其祖上历代喜收藏，“攀古楼”所藏文物富敌东南。潘静淑过门时曾以部分藏品为嫁资，如宋拓欧阳询《化度寺塔铭》、《九成宫醴泉铭》、《皇甫诞碑》等。四，购买及交换。购买与交换藏品是书画收藏的重要渠道。吴湖帆自1924年到上海后非常注意收揽文物，特别是字画。我们可以在诸多经其收藏的古书画上发现其斥资购入的记载。              

　　他的收藏当然是以书画为主，大大小小有千件左右。吴湖帆生前曾经编制了收藏目录，皆亲笔抄写，除了《吴湖帆文稿》中刊印的《吴氏书画记》外，尚有《梅景书屋书画小记》和《梅景书屋书画目录》，当然，前者所收录内容最丰富。这虽然不能得知他收藏的全部，但基本可以知道其大概情况。《梅景书屋书画小记》共有三册，从自述可知，成于1933年，属于比较规范的书画著录，他在前言里叙述了梅景书屋收藏的缘由。

　　《梅景书屋书画目录》，无确切的纪年，该册有《宋元集册》，也就是吴湖帆1936年发现黄公望的《富春山居图卷》之残卷《剩山图》的那一套册子。这说明它成书于1936年之前。从其字体分析，或在《梅景书屋书画小记》之后。该目录仅仅登记书画512件作品名称，对其附属内容一概从略。今秋匡时拍卖中所征集到的王石谷《写宋人词意山水册》十二开（册页签条作“王石谷写唐宋人词意真迹” 十二帧，实为一物）名字赫然在内。

　　从可据的梅景书屋收藏名单看，吴湖帆对清中期之后如扬州画派、海派作品并不钟爱，他收藏下限的重点是清六家，自此上溯，精品颇多。对于重要和非常喜欢的藏品，自然礼遇有加。如称宋代汤叔雅《梅花双爵图》为“神品”，并封为“梅景书屋镇宝”；慈禧对此画也珍赏不已并亲自临摹一本，并于光绪己丑（1889）年元宵节时将临本与真迹一同赐予潘祖荫，而潘祖荫又是吴湖帆夫人潘静淑的叔公。所以这件作品就成为潘静淑、吴湖帆夫妇二人“梅影书屋”的藏品。吴湖帆视之如至宝，在画的锦套上自题“梅影书屋镇宝”之语。这件古代名迹上一次与公众见面是1937年教育部第二次全国美术展览会，而第二次公开露面，则将是在12月1日开槌的匡时07秋季拍卖会上，前后历经整整70年，这无疑将是大陆秋拍的一大亮点。他又跋写黄公望《剩山图》是“画苑墨皇，大痴第一神品”；而得到了王石谷《写宋人词意山水册》十二开后，认为其余王石谷作品皆可“屏去而无憾”等等。要么就是对中意的藏品再三题跋，反复咏之，多次钤盖收藏图章。这从今天可看到的梅景书屋藏品上可以得到证实。吴湖帆是三吴中水平最高，书画当推第一。